血清的限制、有毒物质和代谢废物积累、氧耗尽、流体力学应激等引起的凋亡，

结果显示鹤蟾片含药血清处理后，LAC细胞呈现一系列凋亡特征改变。揭示鹤蟾片

可抑制LAC肿瘤细胞增殖，对细胞凋亡具有一定的促进作用。抑制肿瘤细胞增殖，

诱导其分化，最终使其发生凋亡，是鹤蟾片抗肿瘤作用的主要机制。

    研究中经鹤蟾片含药血清作用后的LAC细胞，倒置相差显微镜下见细胞体积缩

小，核裂解，细胞贴壁能力下降；经AO染色，荧光显微镜下细胞核呈致密浓染的

块状或颗粒状橘黄色荧光，较之对照组有明显的差异。流式细胞仪可定量分析细

胞的凋亡情况，研究表明细胞DNA断裂是渐进的过程，首先断裂成大片段，然后逐

渐生成小片段，初期形成的大片段不易从细胞内溢出。

    细胞周期分析只显示AP峰处于G0-G1期发生凋亡的细胞，TUNEL法更全面地反淘宝网女装冬装新款最好去红血丝的护肤品外用减肥适合25岁的护肤品去黑头瘦腹什么牌子的好

映了整个细胞群的凋亡发生情况，鹤蟾片检测阳性标记率显著高于细胞周期分析

AP峰，这是由于处于S期、G2-M期的细胞，其DNA含量高于G0-G1期细胞，即使DNA

溢出，也不一定进入亚G2期，再则早期凋亡细胞尽管DNA断裂点增加，TUNEL分析

阳性，但其DNA含量并未显著低于正常两倍体细胞。

    细胞凋亡中，染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3’-OH末端，

可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）的作用下，将脱氧核糖核苷酸和荧光素、

过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3’一末端，从而可

进行凋亡细胞的TUNEL法检测。经鹤蟾片含药血清处理的LAC肿瘤细胞，细胞周期

分析凋亡（AP）比例为5.6％，TUNEL法检测凋亡阳性率为12.3％，TUNEL分析结果